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提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法
日期：2025-04-21 21:29
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摘要：
提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法：
① 確定模板 RNA 完整性好，無 DNA 污染。
② RNA 模板中不應(yīng)含有擴(kuò)增反應(yīng)抑制劑。
③ 使用適量的模板 RNA ，模板量太多會(huì)降低特異性，太少會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增不出條帶或條帶太弱。
④ 若模板中有二級結(jié)構(gòu)，可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來提高擴(kuò)增效果。
提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法：
① 確定模板 RNA 完整性好，無 DNA 污染。
② RNA 模板中不應(yīng)含有擴(kuò)增反應(yīng)抑制劑。
③ 使用適量的模板 RNA ，模板量太多會(huì)降低特異性，太少會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增不出條帶或條帶太弱。
④ 若模板中有二級結(jié)構(gòu)，可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來提高擴(kuò)增效果。